절편 제작 개요: 파라핀 포매 조직 전처리 및 박절

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병리학자의 조직학적 검사를 위해 환자의 조직 표본을 전처리 하는데는 세심한 주의, 역량 및 완벽한 절차가 필요합니다. 이 가이드에서는 실제 모범 사례와 일반적인 오류를 방지할 수 있는 간단한 방법을 설명합니다.

이번 가이드에서는 보다 나은 절편 제작 + 부유 + 절편 건조를 위한 팁을 중점적으로 소개합니다. 각 단계에서는 우수한 조직학 검사에 중요한 정보를 제공하고 허용할 수 없는 결과가 발생하는 경우 이러한 단계를 통해 문제를 해결할 수도 있습니다.

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항상 박절에 날카로운 고품질 블레이드를 사용합니다.

가능한 오랫동안 블레이드를 사용합니다. 어느 정도의 "트레인 라인(train line)"은 문제가 되지 않습니다.

나이프 경사각은 항상 각각의 마이크로톰과 블레이드 유형에 맞게 최적화되어야 합니다.

조건이 변경되더라도(다른 마이크로톰, 새로운 블레이드 유형, 다른 왁스 등) 나이프 경사각은 조정되지 않습니다.

조직이 노출되게 하려면 블록을 조심스럽게 다듬어야 합니다. 몇몇 최종 절편은 항상 최종 두께로 박절 되어 블록 표면이 연마됩니다.

조직을 적당히 다듬기 하면 시간을 절약할 수 있습니다. 그러나 최종 절편을 채취하기 전에 표면이 연마되지 않습니다. 이러한 경우 최종 절편은 작고 불규칙한 구멍이 가득 있는 "좀먹은 듯한" 모양으로 나타납니다.

블록은 저온의 젖은 표면에서 냉각되며 항상 차가운 상태로 박절됩니다(녹는 얼음의 표면이 가장 바람직함).

블록은 동결된 후에 박절되며 이로 인해 블록에 균열이 생기는 경우가 있습니다.

블록은 항상 차가운 상태로 박절됩니다.

블록에서 최종 절편이 박절될 때 지연이 발생하는 경우도 있습니다. 이 경우 블록이 따뜻해져 절편이 과도하게 압축될 수 있습니다.

각 블록의 최종 절편을 균일한 속도로 천천히 회전시키면서 조심스럽게 박절합니다.

절편 압축 문제는 부양 수조에서 해결될 것이라 믿고 가능한 고속 회전으로 절편을 박절합니다.

부양 수조의 물을 정기적으로 교체합니다.

부양 수조의 물을 정기적으로 보충하되 가끔씩만 교체합니다. 수조에 오염 물질이 있으면 절편 아래 슬라이드에 나타날 수 있습니다(균류, 곰팡이 등).

슬라이드를 사용하기 전에 항상 슬라이드 청결 상태를 확인합니다. 슬라이드 접촉을 최소화하면 부유 전 편평 세포로 인한 오염을 방지할 수 있습니다.

슬라이드 청결 상태를 확인하지 않습니다. "염색 과정에서 절편이 슬라이드 위에만 있으면 괜찮습니다. " 깨끗한 슬라이드라도 먼지, 유기체 및 다른 오염 물질로 인해 오염될 수 있습니다.

표본을 교체할 때마다 수면의 이물질을 걷어 내면 세포가 있는 절편이 다른 절편으로 인해 오염되는 것을 방지할 수 있습니다.

블록을 교체할 때마다 수면의 이물질을 걷어 내지 않습니다. 이 경우 표본 간 교차 오염이 발생하여 혼란이 야기되고 진단 결과까지 부정확해질 수 있습니다.

절편을 부양할 때 머리카락을 만지거나 손을 비비지 않도록 주의합니다. 피부 각질로 인해 절편이 오염될 수 있습니다.

"몇몇 연구원이 만든 슬라이드에 각질이 많이 포함되었습니다. 그들은 이 문제를 방지할 수 있다는 사실을 잘 모르는 것 같습니다."

부양 수조에서 블록(케이스) 두 개 이상의 절편을 동시에 부유하지 않습니다.

블록(케이스) 두 개 이상의 절편이 동시에 부유 상태가 되는 경우가 있습니다. 이 경우 표본을 정확하게 동정하지 못하는 위험한 상황이 발생합니다. 절편이 같은 유형의 표본에서 생성되는 경우에 특히 위험합니다.

부양 수조 온도를 주의 깊게 점검합니다. 최적의 온도는 왁스 용해점보다 4~5°C 낮은 온도입니다. 절편이 쉽게 평탄화되어야 하지만 왁스가 녹아서는 안 됩니다.

절편이 부양 수조에 15초 이상 있으면 왁스가 녹습니다. 처리 속도가 더 빨라지는 것처럼 보이지만 과도한 고속 팽창으로 인해 조직과 세포가 손상될 수 있습니다.

양 수조에서 절편이 잘 평탄화됩니다.

부양 수조에서 절편이 평탄화되지 않습니다. 수조 온도가 너무 낮고 슬라이드에 절편을 올려 놓을 때 절편에 주름이 있을 수 있습니다.

절편이 평탄화될 때까지만 부양 수조에 담그고 슬라이드에 즉시 올려 놓습니다.

편의상 절편 일부를 부양 수조에 장시간 담가둡니다. 이 경우 과도한 팽창으로 인해 조직이 손상될 수 있습니다.(특히 림프 조직과 같은 민감한 표본의 경우).

브러시나 겸자를 사용하여 부유 상태인 절편의 주름을 제거할 때 세심한 주의를 기울입니다.

브러시나 겸자를 사용하여 부유 상태인 절편의 주름을 제거합니다. 이 경우 눈에 보이는 손상은 물론 보이지 않는 손상도 쉽게 발생할 수 있습니다.

여러 절편 중에서 첫 번째나 두 번째 절편을 사용해서는 안 됩니다.

여러 절편 중에서 다른 절편보다 좋아 보이는 첫 번째나 두 번째 절편을 선택합니다. 이러한 절편이 더욱 좋아 보이는 이유는 나이프를 처음 두 번 통과할 때 차가운 블록이 확장되어 더 두꺼워지기 때문입니다.

부양 수조 안에 기포가 생기기 않도록 주의합니다. 절편을 물에 담그기 전에 보이는 기포를 제거합니다.

부양 수조 내 작은 기포를 무시합니다. 절편 아래에 있는 기포는 절편을 건조하면 눈에 띄게 사라집니다. 기포가 안보이더라도 절편에서 기포 위에 있는 부분이 왜곡되는 경우가 많으며 이 경우 염색 중에 부풀어 오를 수 있습니다.

"점착식"(전하를 띈) 슬라이드 또는 AAS와 같은 절편 점착제 사용을 고려하고 적절하게 사용합니다.

염색 중에 절편이 부풀어 오르는 경우가 있습니다(특히 IHC 의 항원 회복 과정에서 또는 방법상 열을 사용해야 하는 경우). 이러한 경우에는 전하를 띈 슬라이드 또는 절편 점착제가 필요합니다

 절편을 슬라이드 건조기나 핫플레이트에 올려 놓기 전에 잠시 물기를 제거합니다.

 절편의 물기를 올바르게 제거하지 않고 수평 방향으로 건조시켰습니다. 절편이 슬라이드 위에서 움직이고 간혹 평평하게 건조되지 않습니다.

슬라이드 건조기의 온도를 주의 깊게 모니터링합니다.

슬라이드 건조기는 간혹 매우 뜨겁습니다. 온도가 너무 높으면 절편에 핫스팟이 생성되어 균일하게 염색되지 않을 수 있습니다.

최소 및 최대 슬라이드 건조 시간을 모니터링합니다.

슬라이드 건조 시간의 차이가 큽니다. 고온에서 장시간 건조하면 절편이 나쁜 영향을 받을 수 있습니다.

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